Cocos+Gram+positivos+II+y+cocos+Gram+negativos


 * Tema 6. Cocos Gram positivos II y cocos Gram negativos.**

G. Streptococcus: Caracteres morfológicos, antigénicos y hemolíticos. Criterios de clasificación. Diagnóstico microbiológico. **(Juan Alvarez López)**. Grupo de S. mutans: Metabolismo de la sacarosa. Acción patógena. Factores de virulencia. Antigenicidad. Otros grupos orales: //S. salivarius //, //S. milleri // y //S. oralis //. Cocos Gram negativos orales: G. //Veillonella //. **(Ana González Sanz) **



//G. Streptococcus //: Caracteres morfológicos, antigénicos y hemolíticos. Criterios de clasificación. Diagnóstico microbiológico. **(Juan Alvarez López) **. Cocos Gram. + agrupados en cadenas que puede ser diplococos o cadenas muy largas porque se replican en 1 solo plano. Anaerobios aerotolerantes catalasa – (a diferencia de //Staphylococcus//). Algunos son patógenos estrictos de origen ambiental y otros forman parte de la microbiota intestinal y del tracto respiratorio superior. No tienen cápsula excepto aquellos que viven en la faringe. El medio de cultivo idóneo es agar–sangre enriquecido con aminoácidos. Hay varias especies que se clasifican según 3 criterios:

1) **Hemólisis**:

i. __α-hemolíticos__: la hemólisis es parcial porque sólo utilizan Fe consiguiendo un color verdoso debido a la oxidación de hemoglobina en biliverdina. ii. __β-hemolíticos__: hemólisis completa (Fe + aminoácidos) que deja un halo transparente alrededor de las colonias. Casi todas las especies patógenas son β-hemolíticas y casi todas las β-hemolíticas son patógenas. iii. __γ-hemolíticos__: no hay hemólisis.

2) **Estructura Ag.**:

Son antígenos localizados en la pared celular y en la cápsula, con 3 variedades: i. __Ag. de grupo__: situados encima de los péptidoglucanos, son polisacáridos o ac. teicoicos que permiten dividir a los //Streptococus// en los __ grupos de Larcefield __, muy útiles en diagnóstico (destacan A, B y D). Algunas especies como el //Neumococo// no tienen este Ag. ii. __Ag. de tipo__: situados encima, son proteínas muy relacionadas con la virulencia. iii. __Ag. capsulares__: por encima, son polisacáridos o dextranos (polímeros de ac. hialurónico).

3) **Pruebas fisiológicas**:

Hemólisis en agar–sangre:

i. __α__:

Solubles en bilis. Sensibles a optoquina : + : //S. pneumoniae// o //Neumococo//. – : //S. viridans//.

ii. __β__:

Según sensibilidad a bacitracina : + : GRUPO A  à  //S. pyogenes//. – : NO GRUPO A.

iii. __γ__:

Tolerantes a altas concentraciones de sal. Según su crecimiento en biliesculina : + : //Enterococos//. – : No //Enterococos//. 
 * //__Streptococcus pyogenes__//**:

Estreptococo β-hemolítico del grupo A y encapsulado. Forma parte de la microbiota de la rinofaringe en el 5 – 10% de la personas.

Factores de virulencia: __Ag. superficiales__: Proteína M y cápsula, propiedades antifagocitarias. __Enzimas__: Estreptoquinasa: fibrinolisis. EstreptoDNAasa: no es una verdadera DNAasa porque desdobla el ADN. Hialuronidasas y proteasas (necrosis tisular). __Toxinas__: Toxina eritrogénica o exotoxina pirógena: sus genes están codificados en fagos y son responsables del exantema de la __escarlatina__. Estreptolisina O: responsable de la hemólisis en profundidad, tiene gran afinidad por el colesterol degradando las membranas plasmáticas de hematíes y leucocitos. Es antigénica y sensible al O2. Estreptolisina S: responsable de la hemólisis en superficie, tiene gran afinidad por los fosfolípidos y no es antigénica.

Cuadros clínicos: Faringoamigdalitis: es contagiosa y frecuente en niños, caracterizada por fiebre, dolor de garganta, exudado con bacterias y PMN (si tiene origen vírico aparecen más mononucleares). Escarlatina: afecta a niños cuando las cepas de //S. pyogenes// son lisogenizadas por un fago productor de toxina eritrogénica, causando exantema generalizado. Fiebre reumática: aparece en faringoamigdalitis o escarlatina mal curadas.

Diagnóstico: Debe ser bacteriológico. Exudados rinofaríngeos que se siembran en agar–sangre para observar colonias β-hemolíticas. Catalasa – a diferencia de //Staphylococcus//. Resistencia a optoquina y β-hemolisis a diferencia del //Neumococo//. Sin embargo puede utilizarse un diagnóstico indirecto buscando __ antiestreptolisina O __ en el suero del enfermo, en ese caso se incuba en una placa y se inhibe la hemolisis.

Tratamiento: Los antibióticos de elección son cefalosporinas y macrólidos. Antes se utilizaba estreptomicina, pero se prohibió por sus efectos tóxicos. A veces se usa ** augmentine ** (amoxicilina + ácido clavulánico). 
 * //__Streptococcus pneumoniae__//** o **//__Neumococo__//**:

Diplococos α-hemolíticos más alargados que otros cocos. Cápsula voluminosa pero carecen de Ag. de grupo. Colonias como gotas de rocío que se lisan fácilmente. 50% de personas portadoras.

Factores de virulencia: Cápsula: propiedades antifagocitarias. Neumolisina: hemolisina antigénica muy similar a estreptolisina O. Neuoaminidasa: enzima exocelular que hidroliza el ácido neuroamínico de los glucolípidos y glucoproteínas de la membrana plasmática. PSP: responsable de la adherencia y se cree que también tiene funciones citotóxicas.

Cuadros clínicos: Neumonía clásica: es de tipo lobular y puede afectar a personas sanas (contagiadas por un portador). Sin embargo, son más frecuentes las autoinfecciones endógenas en situaciones de inmunodepresión, ya que la persona aspira los //Neumococos// y se instalan en sus alvéolos pulmonares. La sintomatología se caracteriza por fiebre y esputo purulento. Meningitis: afecta a niños y adultos, es la 3ª causa de meningitis. **// Meningococo // > //Haemophylus// > //Neumococo// .** Artritis y endocarditis.

Diagnóstico: Bacteriológico con varias opciones: Siembra de esputos (neumonía) o LCR (meningitis) en agar–sangre con antibióticos inhibidores de la microbiota y con optoquina, obteniendo a su alrededor un halo de inhibición. Mezcla de una suspensión de colonias con sales biliares produciendo su lisis. Demostración de Ag. capsulares por aglutinación de látex y contrainmunoelectroforesis.

Tratamiento: El //Neumococo// suele ser resistente a las penicilinas, se utilizan cefalosporinas o macrólidos.

Son β-hemolíticos del grupo B. A veces (10%) forman parte de la microbiota de vagina e intestino. Producen meningitis neonatales y septicemias a partir de madres portadoras. Los antibióticos de elección son β-lactánicos y aminociclitoles.
 * __//Streptococcus agalactiae://__**

Streptococcus γ-hemolíticos del grupo D que forman parte de la microbiota intestinal. Producen infecciones nosocomiales (infecciones urinarias, bacteriemias, endocarditis….). Resistente a β-lactámicos. Antibiograma: macrólidos y teicoplanina.
 * //__Enterococcus faecalis / faecium:__//**

Familia α-hemolíticos (resistentes a optoquina) y sin cápsula. La especie más importante es //Streptococcus mutans//, productor de la caries porque degrada azúcares en a. láctico y esta acidificación destruye el esmalte. Muy sensibles a penicilinas y macrólidos.
 * __//Streptococcus viridans://__**

<span style="FONT-SIZE: 24pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-fareast-font-family: 'Times New Roman'; mso-fareast-language: ES">__COCOS GRAM – (Ana González Sanz)__ <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">Las Bacterias Gram negativas **se caracterizan por presentar una [|membrana celular] interna la cual se rodea por una pared celular delgada de [|peptidoglicano] y, hacia el lado externo del cuerpo de la célula una membrana celular externa que recubre la pared celular en estas bacterias. Entre la membrana citoplasmática interna y la membrana externa está el espacio periplásmico el cual presenta una sustancia llamada periplasma la cual contiene [|enzimas] importantes para la nutrición en estas [|bacterias]. La membrana externa presenta una estructura llamada [|lipopolisacárido] (LPS) y tiene diversas proteínas, siendo una de ellas las proteínas llamadas porinas o canales proteícos. El LPS está formado por tres regiones: el polisacárido O (antígeno O), una estructura polisacárida central (KDO) y el lípido A (endotoxina).** <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">Los unicos coco gram- de la cavidad oral son los cocos __veillonella__: v.parvula, v. atypica, v. dispar.

<span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">Hay otras especies de gram – pero que estan en la cavidad oral de animales.

Se agrupan en cadenas cortas o en parejas. No metabolizan los hidratos de carbono Mediante la fermentacion del ac lactico produce energia., ac acetico, CO2, y ac propionico Se encuentra en la placa dental, en el dorso de la lengua, saliva y intestino. Tiene actividad proteolitica, es decir, produce ciertas enzimas que degradan proteinas. se liberan compuestos volatiles, que dan lugar a la halitosis.

//__<span style="FONT-SIZE: 16pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-fareast-font-family: 'Times New Roman'; mso-fareast-language: ES; mso-themecolor: text1">Veillonella __//** (Ana González Sanz) <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">La veillonella la identificó Zuber Veillón y dadas sus características distintas al estreptococus mutans fué seleccionada como el primer microrganismo a enfrentarla con él en las investigaciones que se realizarían. <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">Las veillonellas son cocos gram-negativos anaerobios asociados con salud oral. Para su aislamiento, se han reportado diferentes medios de cultivo. Las colonias de //Veillonella// spp. producen fluorescencia roja visible con luz ultravioleta, que desaparece en contacto con oxígeno. <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">Esta propiedad sería útil para su identificación presuntiva rápida. Los objetivos de este trabajo fueron: <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-fareast-font-family: Arial; mso-themecolor: text1"> 1-  <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">comparar el medio selectivo para //Veillonella// de Rogosa con los medios de cultivo recomendados por diferentes autores para determinar en cual de ellos se obtiene una mejor recuperación de veillonellas a partir de saliva, ya que esta muestra es generalmente utilizada para determinar la presencia y predominio de esta bacteria. <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-fareast-font-family: Arial; mso-themecolor: text1"> 2-  <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">detectar la producción de fluorescencia en estos medios de cultivo como método rápido de identificación. Los medios de cultivo estudiados fueron: medio selectivo para //Veillonella//, agar Schaedler para anaerobios con vitamina K, agar tioglicolato, agar infusión cerebro corazón, agar Brucella, agar tripteína soja y agar Columbia con y sin el agregado de vancomicina y sangre lacada. La muestra ensayada fue un //pool// de saliva. Se hicieron recuentos de colonias de veillonellas y de microorganismos totales expresados en UFC/ml de saliva. La mayor recuperación de veillonellas en saliva se obtuvo en el medio selectivo para //Veillonella// con vancomicina y sangre lacada. Sólo se observó producción de fluorescencia en este medio. <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-fareast-font-family: 'Times New Roman'; mso-fareast-language: ES; mso-themecolor: text1"> <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">Las veillonellas constituyen una fracción muy importante de la población bacteriana total de las superficies epiteliales de la cavidad oral del hombre y son los anaerobios más numerosos en saliva .En la boca edentula, habitan la lengua y la mucosa bucal y en la boca dentada también están en la placa dental. <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1"> La colonización oral con //Veillonella// spp. es considerada un indicador de salud oral, por su habilidad para neutralizar la acidez local en la placa dental como se ha demostrado en un modelo animal experimental. <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">Las veillonellas se caracterizan por su metabolismo inusual. Son generalmente incapaces de fermentar los hidratos de carbono, pero crecen bien anaeróbicamente sobre lactato, piruvato, malato o fumarato. <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1"> La reducción de la carga acidógena de la placa dental logra al convertir intermediarios metabólicos y productos finales de otras bacterias, tales como ácido láctico y piruvato, en ácidos orgánicos más débiles .Así se han encontrado, en la cavidad oral de niños y adultos libres de caries, proporciones inusualmente elevadas de veillonellas .Estos microorganismos raramente causan infecciones locales o diseminadas, pero cuando se los encuentra, casi siempre es en infecciones polimicrobianas y asociados con condiciones debilitantes. Las especies de //Veillonella// figuran entre las primeras colonizantes de la cavidad oral y una vez que han colonizado tienden a persistir en ese ambiente. El requisito para la colonización microbiana inicial es la adherencia bacteriana a las superficies orales. La colonización primaria con //Veillonella// spp. es independiente de la presencia de dientes erupcionados. La adherencia de //Veillonella// spp. a los tejidos del huésped y a hidroxiapatita cubierta con saliva es pobre, pero participan en coagregaciones interbacterianas, un modo por el cual se fijan vía la unión secundaria a otras bacterias capaces de la adhesión primaria. <span style="FONT-SIZE: 12pt; COLOR: black; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-themecolor: text1">Dado que están involucradas en interacciones beneficiosas en la cascada de colonización oral y en el mantenimiento de la homeostasis, debe conocerse su rol e impacto específico. Debido a las dificultades prácticas para evaluar el número de microorganismos en la placa dental, se prefiere efectuar los recuentos en saliva, dado que la misma baña todas las superficies y refleja los niveles de microorganismos presentes en la cavidad oral. Durante el //screening// de aislamientos clínicos anaeróbicos de rutina, Chow //et al//. observaron que las colonias de //Veillonella// spp. regularmente producían fluorescencia roja visible sobre el agar BHI cuando eran expuestas a luz UV de onda larga (366 nm), fenómeno que revertía al ser expuestas al oxígeno atmosférico. Esta propiedad puede ser útil para la identificación presuntiva rápida de este microorganismo. <span style="FONT-SIZE: 12pt; LINE-HEIGHT: 115%; FONT-FAMILY: 'Arial','sans-serif'; mso-fareast-font-family: 'Times New Roman'; mso-fareast-language: ES">